L'imagerie à super-résolution a révélé que les protéines synaptiques clés sont organisées dynamiquement au sein de domaines sous-synaptiques (SSD). Pour examiner comment différents récepteurs inhibiteurs sont régulés, nous avons effectué une microscopie de reconstruction optique stochastique directe bicolore (dSTORM) de GlyRs et GABAA Rs au niveau de synapses inhibitrices mixtes dans les neurones de la moelle épinière. Nous montrons que les GlyR et GABAA endogènes ainsi que leur protéine d'échafaudage commune, la géphyrine, forment des SSD qui s'alignent avec le RIM1/2 pré-synaptique, créant ainsi des nanocolonnes trans-synaptiques. De manière frappante, les GlyR et les GABAA R occupent différents espaces sous-synaptiques, ne présentant qu'un chevauchement partiel au niveau des synapses inhibitrices mixtes. Lorsque l'activité du réseau est augmentée par un traitement à la 4-aminopyridine, le nombre de copies GABAA R et le nombre de SSD GABAA R sont réduits, tandis que les GlyR restent largement inchangés. Cette régulation différentielle est probablement le résultat de changements dans la phosphorylation de la géphyrine qui se produisent préférentiellement en dehors des SSD. La régulation dépendante de l'activité des GABAA Rs par rapport aux GlyRs suggère que différentes voies de signalisation contrôlent le regroupement sous-synaptique des récepteurs. Pris ensemble, nos données renforcent l'idée que l'organisation sous-synaptique précise des GlyR, des GABAA R et de la géphyrine a des conséquences fonctionnelles sur la plasticité des synapses inhibitrices mixtes.